Ziegler, Slava

Identifizierung und Charakterisierung neuer tumorrelevanter Gene, die unter Kontrolle des Wnt/β-Catenin-Signalwegs stehen

Mittels DNA-Microarray-Analyse wurden die Expressionsmuster von C57MG-Wnt-1- und C57MG-pLNCx-Zellen verglichen. 140 differentiell exprimierte Gene wurden identifiziert. Neun Wnt-1-induzierte Gene wurden näher analysiert. Die Gene 24p3, JE und Pedf werden entgegengesetzt durch Wnt-1 und durch LiCl reguliert. Untersuchungen des Pedf-Promotors weisen auf die Repression von Pedf durch den Wnt-Signalweg hin. Das 24p3-Gen unterliegt einer Inhibition durch LiCl und Wnt-3a, während langfristige Wnt-1-Einwirkung zur Induktion des Gens in C57MG-Zellen führt, wie Expressions- und Promotoruntersuchungen ergaben. In den verwendeten Zellen kann 24p3 seine Expression autokrin verstärken und kolokalisiert mit dem PML-Protein. In Brusttumoren der Maus lokalisiert das Protein in Bereichen mit TUNEL-positiven Zellen. NGAL, das menschliche Homolog von 24p3, wurde in Darmzelllinien, Tumor- und Normalgeweben untersucht. Die erhaltenen Daten deuten auf komplexe Regulationsmechanismen der Wnt-Zielgene hin.

The expression patterns of C57MG-Wnt-1 und C57MG-pLNCx cells were compared by using the DNA microarray technique. 140 differentially expressed genes were identified. Nine Wnt-1 induced genes were further analysed. For 24p3, JE and Pedf an opposite regulation by Wnt-1 and by LiCl in the C57MG cells was detected. Studies with the Pedf promoter are indicative of the down regulation of the Pedf gene by an active Wnt pathway. The 24p3 gene is subjected to a negative regulation by LiCl and Wnt-3a, whereas long-term activation of the Wnt pathway results in the induction of 24p3, as detected by expression and promoter analysis. In the used cells, 24p3 enhances its own expression in an autokrine manner. The protein localizes together with PML and is detected in TUNEL-positive regions in mouse breast tumours. NGAL, the human homologue of 24p3, was analysed in colon cell lines, normal and tumour tissues. The obtained data suggest complex mechanisms of regulation of the Wnt target genes.