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Die Arbeit untersucht, ob das Gram-negative Bakterium Pseudomonas aeruginosa eine funktionelle Thiol-Disulfid-Oxidoreduktase DsbA bildet, und ob diese an der Proteinsekretion beteiligt ist. Ein dsbA-homologes Gen aus P. aeruginosa wurde in E. coli
überexpremiert und das Genprodukt gereinigt. Die katalytische Aktivität von DsbA konnte nachgewiesen und ein Cys-X-X-Cys-Motiv als katalytisches Zentrum identifiziert werden. DsbA ist im Periplasma der P. aeruginosa-Zelle lokalisiert und wird
konstitutiv gebildet. In einer dsbA-Deletionsmutante ist die extrazelluläre Lipaseaktivität stark reduziert. Durch eine zusätzliche Inaktivierung des dsbC-Gens wurde die Lipaseaktivität so weit reduziert, daß sie der einer
sekretionsdefizienten Mutante entsprach. Mit Hilfe einer Cys-X-X-Ser-Variante von DsbA konnte ein DsbA-Lipase-Komplex im Periplasma nachgewiesen und damit gezeigt werden, daß DsbA während des Sekretionsprozesses als direkter Donor für die
Disulfidbrücke der Lipase fungiert.
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