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Autor:  

Krumm, Holger

Titel:  

Beiträge zur gerichteten Evolution von Hydrolasen


Dissertation 
URN:  urn:nbn:de:hbz:294-11017
URL:  http://www-brs.ub.ruhr-uni-bochum.de/netahtml/HSS/Diss/KrummHolger/diss.pdf
Format:  application/pdf (2.1 M)
Kommentar:  Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie. Tag der mündlichen Prüfung: 2004-07-21

Inhaltsverzeichnis
Datei:  http://www-brs.ub.ruhr-uni-bochum.de/netahtml/HSS/Diss/KrummHolger/Inhaltsverzeichnis.pdf
Format:  application/pdf (63 k)

Zusammenfassung
Datei:  http://www-brs.ub.ruhr-uni-bochum.de/netahtml/HSS/Diss/KrummHolger/Zusammenfassung.pdf
Format:  application/pdf (75.9 k)

Schlagworte:  Elektronensprayionisations-Massenspektrometrie; Biokatalyse; Enantioselektivität; Lipasen; Epoxidhydrolase

Inhalt der Arbeit: 

Die vorliegende Arbeit beschreibt zwei unterschiedliche Projekte, die beide im Bereich der Methodenentwicklung für die gerichtete Evolution von Hydrolasen angesiedelt sind.
Zunächst werden Studien zur Verwendung der Elektronensprayionisations-Massenspektrometrie in der Hochdurchsatzbestimmung von Enantiomerenüberschüssen und Reaktionsumsätzen vorgestellt. Diese Methode findet anschließend Anwendung in Untersuchungen zur Desymmetrisierung eines meso-Diacetats durch die Bacillus subtilis Lipase lip A sowie der Hydrolyse von unterschiedlichen Oxiranen durch die Epoxid-Hydrolase aus Aspergillus niger. Weiterhin wird in diesem Zusammenhang auf Mutagenese-Strategien zur Erzeugung von enzymatischer Vielfältigkeit eingegangen.
Der zweite Teil der Arbeit zeigt einen möglichen Ansatz zur Transformation einer Lipase in eine Diels-Alderase. Hier stehen Design und Synthese von Substraten und die Vorauswahl von Enzymen durch Hydrolyse-Experimente im Mittelpunkt.


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