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Um ein hohes Niveau der Überexpression heterologer Proteine in L. tarentolae zu erreichen, bestand der Ansatz in der Steigerung der Menge heterologer mRNA. Dies sollte entweder durch eine Reduktion der Abbau- oder eine Steigerung der
Produktionsrate der mRNA geschehen.
Die Reduktion der Abbaurate basiert auf dem derzeit aktuellen Modell der Genexpression der Trypanosomatidae, für welche angenommen wird, dass die 3´UTR des proteinkodierenden Gens die Stabilität der mRNA bestimmen. Dazu wurden
zufällig ausgewählte Sequenzen aus dem L. tarentolae-Genom auf ihre Eignung als 3´UTR eines proteinkodierenden Gens zu funktionieren überprüft.
In einem zweiten Ansatz konnte eine Erhöhung in der mRNA-Produktion durch eine Steigerung der Kopienzahl transkribierter Gene erreicht werden. Zu diesem Zweck wurde der induzierbare L. tarentolae Stamm genutzt. Dazu wurde ein artifizielles
Episom für induzierbare Proteinexpression konstruiert.
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