|
Zur Identifizierung potentieller Engpässe in der Lipaseproduktion wurde eine Cosmidbank von B. glumae angelegt und durchgemustert. Dabei konnten zwei potentielle Engpässe identifiziert werden. Das Gen einer putativen Protease von B. glumae
wurde kloniert, das Protein gereinigt und eine erste biochemische Charakterisierung durchgeführt. Des Weiteren konnte gezeigt werden, dass die Etablierung eines T7 RNA-Polymerase-abhängigen Expressionssystems in B. glumae möglich ist. Neben
der Integration des T7 RNA-Polymerase-Gens in das Chromosom von B. glumae, wurden außerdem Lipase-Überexpressionsvektoren hergestellt. Eine Untersuchung der Regulation der Lipase-Genexpression ergab, dass die Genexpression auf transkriptionaler
Ebene reguliert wird. Darüber hinaus wurde gezeigt, dass unter induzierenden Bedingungen, die Zugabe von Emulgatoren oder Detergenzien eine deutliche Steigerung der extrazellulären Lipaseaktivität bewirken.
|